整個(gè)小鼠胚胎的圖像：（左）原始寬場(chǎng)成像結(jié)果和（右）應(yīng)用Large Volume Computational Clearing（LVCC）后的成像結(jié)果。圖片來(lái)源：A. Popratiloff和Z. Motahari，美國(guó)喬治·華盛頓大學(xué)。

本文介紹了如何使用THUNDER Imager 3D Cell Culture和Large Volume Computational Clearing（LVCC）對(duì)小鼠胚胎快速、高對(duì)比度成像，實(shí)現(xiàn)了對(duì)軸突生長(zhǎng)和腦神經(jīng)發(fā)育的研究。許多在發(fā)育早期階段損害神經(jīng)回路發(fā)育的遺傳性疾病被認(rèn)為會(huì)對(duì)行為造成干擾。用小鼠模型研究早期神經(jīng)發(fā)育的細(xì)胞變化、定義與人類(lèi)疾病相似的行為及潛在發(fā)育機(jī)制，是非常困難的。而鑒別發(fā)育的神經(jīng)元回路中三叉神經(jīng)（其參與面部感覺(jué)和運(yùn)動(dòng)機(jī)能）軸突生長(zhǎng)的早期分化，使得這些困難迎刃而解。

人們普遍認(rèn)為，很多遺傳性疾病都通過(guò)損害神經(jīng)回路發(fā)育的早期階段來(lái)對(duì)行為產(chǎn)生干擾^[1]。事實(shí)證明，在模型動(dòng)物中分辨早期神經(jīng)發(fā)育中細(xì)胞的此類(lèi)變化具有一定的難度。用與人類(lèi)遺傳性疾病中臨床顯著缺陷相似的基因突變小鼠模型來(lái)定義行為、神經(jīng)回路和潛在發(fā)育機(jī)制，是非常困難的^[1]。檢測(cè)單個(gè)神經(jīng)元初始分化中的變化難以實(shí)現(xiàn)。這些挑戰(zhàn)可通過(guò)確定發(fā)育的神經(jīng)回路中三叉神經(jīng)這一關(guān)鍵組分的軸突生長(zhǎng)的早期分化來(lái)解決^[1]。通過(guò)著眼于參與面部感覺(jué)及運(yùn)動(dòng)機(jī)能如哺乳、進(jìn)食、咬、咀嚼和吞咽等的三叉神經(jīng)（腦神經(jīng)V），以及軸突生長(zhǎng)和原生傳導(dǎo)通路，可以對(duì)使用組織學(xué)處理可能會(huì)缺失的三維環(huán)境進(jìn)行研究^[1]。本文介紹如何使用THUNDER Imager 3D Cell Culture和Large Volume Computational Clearing（LVCC）^[2,3]對(duì)小鼠胚胎快速、高對(duì)比度成像，以幫助進(jìn)行腦神經(jīng)發(fā)育研究。

圖1：展示整個(gè)小鼠胚胎的俯視圖，顯示原始數(shù)據(jù)（A）與應(yīng)用LVCC后（B）的差異。根據(jù)相對(duì)物鏡深度進(jìn)行顏色標(biāo)識(shí)的胚胎的角度視圖，其中最大深度為672 μm。C）應(yīng)用LVCC后的腦部側(cè)視圖，顯示了沿Z軸方向的精密細(xì)節(jié)。圖片來(lái)源：Anastas Popratiloff博士和Zahra Motahari博士，喬治·華盛頓大學(xué)納米制造與成像中心（GWNIC），美國(guó)華盛頓特區(qū)。

結(jié)論

與傳統(tǒng)的寬場(chǎng)成像不同，THUNDER技術(shù)Large Volume Computational Clearing（LVCC）^[2,3]在對(duì)小鼠胚胎中的腦神經(jīng)發(fā)育成像時(shí)，顯著增強(qiáng)了圖像對(duì)比度，對(duì)精密細(xì)節(jié)有更好的解析。

相關(guān)產(chǎn)品

THUNDER Imager 3D Live Cell 和 3D Cell Culture